期刊简介

               本刊及时报道国内外分子医学新技术、新知识和新进展,集前瞻性、权威性、专业性于一身的学术期刊,是我国第一份以分子诊断与治疗为主要内容的正规科技学术期刊,也是我国分子诊断与治疗研究领域工作者的学术园地和交流平台,成为我国分子诊断与治疗研究领域工作者在学术上走向世界的桥梁。                

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  • 杂志名称:分子诊断与治疗杂志
  • 主管单位:中山大学
  • 主办单位:中山大学
  • 国际刊号:1674-6929
  • 国内刊号:44-1656/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), 万方收录(中)
分子诊断与治疗杂志2014年第06期

基因组DNA甲基化的高效毛细管电泳定量检测

张敏;陈倩;张丽娟;权力

关键词:DNA甲基化, 高效毛细管电泳, 定量分析
摘要:目的:建立快速准确的高效毛细管电泳( HPCE )定量基因组 DNA 甲基化的方法。方法以含有十二烷基磺酸钠(SDS)的碳酸氢钠溶液作为背景电解质溶液,优化运行电压、柱温,对DNA组成单元脱氧核苷酸进行分离定量。结果5种脱氧核糖核苷和5种核糖核苷在10 min 内实现基线分离。脱氧胞苷(dC)的标准曲线为Y =172540.15X-6.19,相关系数(R)为0.999,线性范围从2×10-3 mol/L 到2×10-1 mol/L。5-甲基脱氧胞苷(5 mdC)的标准曲线为 Y =170271.74X-46.19,相关系数(R)为0.995,线性范围从1×10-4 mol/L 到2×10-2 mol/L。日内相对标准偏差(RSD%)<5%,日间相对标准偏差( RSD%)<9%。5 mdC 和 dC 的检测限均为1×10-5 mol/L。样品的甲基化程度以(5 mdC )含量占总脱氧胞苷(5 mdC + dC )的比率表示。应用本方法分析小牛胸腺 DNA 的甲基化水平,结果为6.18%,与本研究组所得液质联用(LC-MS/MS)的定量结果(6.77%)和文献报导中应用液相色谱-紫外检测器(HPLC-UV)的检测结果(6.26%)对比,一致性好。结论本研究建立的方法分析速度快,准确性高,稳定性好,灵敏度满足微量样本的检测需求,可以用于临床甲基化诊断。